用玉米與小麥—簇毛麥易位系雜交誘導小麥雙單倍體

用玉米與小麥—簇毛麥易位系雜交誘導小麥雙單倍體

作者:師大云端圖書館 時間:2018-10-24 分類:碩士論文 喜歡:1192
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【摘要】簇毛麥(HaynaldiavillosaL.2n=14,VV)是一年生異花授粉草本植物,原產于地中海沿岸和高加索地區,是小麥的野生近緣物種,抗多種小麥病害,它幾乎對所有白粉病生理小種表現免疫,還具有抗寒、耐旱、籽粒蛋白質含量高等多種優良性狀。培育簇毛麥小片段易位系是利用簇毛麥有益基因的理想途徑。用玉米花粉誘導小麥單倍體再用秋水仙堿處理使染色體數加倍是一種高效率的小麥單倍體育種途徑,這種方法能在較短的年限內快速獲得純合體。本研究以多種小麥-簇毛麥易位系為母本材料,利用白甜糯玉米和蘇玉糯6號玉米花粉用滾粉法或沾粉法與之雜交。授粉后24小時剪下雜交穗,噴施100ppm濃度的2,4-D,在人工氣候箱中進行割穗離體培養。14-15天后,剪下雜交穗剝取膨大的穎果,在超凈工作臺解剖鏡下剝取幼胚,接種于1/2MS培養基中進行胚培養至成苗。待小麥單倍體苗長到2-3片真葉后將得到的幼苗遵照逐漸過渡的原則從培養基中移栽到土壤中。單倍體苗有2-3個以上分蘗時,采用浸泡分蘗節法或分蘗節注射法用秋水仙堿進行染色體加倍處理。用秋水仙堿處理后的植株移栽至土壤,待成熟時收獲套袋自交結實植株。收獲的種子,用分子細胞學方法進行鑒定,篩選含有簇毛麥外源片段的小麥雙單倍體植株。利用上述方法兩年中得到的單倍體胚分別為1031個和66個,得到的結實植株分別為42株和12株。對第一年實驗獲得的42個結實植株后代進行體細胞染色體計數,發現42株結實植株均為雙單倍體植株。這些植株經根尖細胞有絲分裂中期染色體GISH、順次C-分帶-FISH、分子標記、花粉母細胞減數分裂中期I染色體配對和自交結實率鑒定,共檢測到7株涉及簇毛麥外源染色體片段的DH植株,其中包括6個整臂易位材料和1個大片段易位材料,并初步判斷6個整臂易位材料為T4VS-4DL純合易位系,1個大片段易位材料為T2BS-1VS·1VL純合易位系。本研究首次利用玉米花粉與攜有外源染色體的小麥-簇毛麥易位雜合體進行有性雜交誘導小麥單倍體,進而用秋水仙堿對小麥單倍體植株處理,成功的獲得遺傳穩定的含簇毛麥外源染色體片段的小麥雙單倍體。
【作者】宋營營;
【導師】陳佩度;
【作者基本信息】南京農業大學,作物遺傳育種,2013,碩士
【關鍵詞】小麥;簇毛麥;玉米;單倍體;雙單倍體;C-分帶;熒光原位雜交;分子標記;

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